生物化学実験や細胞培養において,適切なバッファを選択することは,実験の正確性と安定性を確保するための重要なステップの1つです.N'-bis (((2-エタノ硫酸)) とHEPES (4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラゼニテノ硫酸) は,一般的に使用されるバッファである.溶液のpHを調整する上で重要な役割を果たしますが,それらの特性,適用シナリオ,予防措置はかなり異なります.科学研究者や実験室技術者がこれらの2つのバッファを正しく選択し使用するのに役立つため,PIPESとHEPESの重要な違いの詳細な分析は以下のとおりです..
一パイプとヘプスの化学特性と溶解性
1. HEPES
(1) 化学的性質:HEPESは,分子構造にアミノ酸と硫酸酸群を含むズウィテリオニックバッファです.広範囲のpH範囲で水素イオン濃度の変化を緩衝する (6.8-8.2) 溶液pHの安定性を維持する.
(2) 溶解性:HEPESは水に溶解性が高いため,追加の溶解ステップを必要とせずに様々な生化学実験システムで簡単に使用できます.
2パイプ
(1) 化学特性:PIPES は,HEPES より少し狭いPH バッファー範囲で,6.1〜7で理想的なバッファーである.5分子構造のピペラジン環と硫酸基は,特定の条件下でpHをバッファリングする能力を与えます.
(2) 溶解性:HEPESとは異なり,PIPES自体は水に溶けないが,NaOH水溶液に溶ける.この性質は使用前に特定の溶解処理を必要とする.実際の実験で考慮する必要があります.
2応用シナリオとPIPESとHEPESの機能的違い
1HEPES の適用
(1) 細胞培養:HEPESは,細胞に無毒であり,正常な生化学反応を妨害しないため,様々な種類の生物の細胞培養基間で広く使用されています.特に,安定したpH値を維持するために長い時間を要する実験システムでは.
(2) タンパク質と酵素の研究:タンパク質安定性研究において,HEPESは溶液のpHを長時間恒定に保つことができるため,しばしばバッファとして使用されます.タンパク質の構造と機能を維持するのに有益です同時に,高度に揮発性があり,pHに敏感なタンパク質や酵素の研究にも使用されています.
(3) 分子生物学:DNA/RNA抽出,PCR診断キット,生化学診断キットでは,HEPESは実験中にpHの安定性を確保するための重要なバッファ成分です.
2パイプの適用
(1) タンパク質浄化:PIPESは,タンパク質浄化分野において特殊な用途があります.例えば,リンゴの浄化には,リンゴの塩基配色図を用いて,また,ゲルフィルタリングによって,再結合型GTP結合タンパク質ARF1とARF2の浄化などほとんどの金属イオンと安定した複合体を形成しないという特徴により,金属イオンを含む溶液システムでうまく動作する.
(2) 染色体解析:カチオン交換染色体検査では,PIPESは結合バッファまたは溶液の成分としてしばしば使用されます.しかし,過剰なイオン強度やpKa値の変化による実験エラーを避けるために,その濃度は厳格に制御する必要があります..
(3) 特定の生化学実験:PIPESの応用範囲は比較的狭いものの,特定の特定の実験において,バッファーとして代替不能な役割を果たします.リン酸カルシウムやDNAの降水システムなどAFMと電極化実験
III. PIPES と HEPES バッファーの使用に関する注意事項
1HEPES の予防策
(1) 干渉: HEPES は,ほとんどの場合生化学的過程を干渉しないが,DNAと制限酵素との間の反応を干渉する.DNA酵素切断の正確な制御を必要とする実験には適していません同時に,ローリーの方法はタンパク質含有量を決定するのに適していないため,決定結果の正確さに影響を与える可能性があります.
(2) 濃度選択: HEPES を使用するときは,適切な濃度を実験要件に応じて選択する必要があります.十分なバッファリング能力を達成するために,培養基質はしばしば20mmol/LのHEPESを含みます..
2パイプに対する注意事項
(1) 溶解性:PIPES を使用する前に,溶解していない粒子が実験に干渉するのを避けるために,NaOH 水溶液に完全に溶けていたことを確認します.
(2) 自由基の形成:PIPES は 自由基を形成 する こと が でき ます.したがって, redox 反応 を 避ける 必要 が ある 実験 に 用い られ て は い ませ ん.
(3) 濃度依存性:PIPESのpKa値は濃度に依存し,その離子強度は比較的大きい.濃度の選択と管理に特に注意を払う必要があります..
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